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2020藥典方法提高|復(fù)方鹽酸阿替卡因注射液的分析:腎上腺素的分析
更新時(shí)間:2018-12-20   點(diǎn)擊次數(shù):2466次

 

復(fù)方鹽酸阿替卡因注射液的分析

腎上腺素的分析

CAPCELL PAK C18 MGII

復(fù)方鹽酸阿替卡因注射液為復(fù)方制劑,是鹽酸阿替卡因腎上腺素的滅菌水溶液,作為口腔用局部麻醉劑,適用于涉及切骨術(shù)及粘膜切開(kāi)的外科手術(shù)過(guò)程。

 

鹽酸阿替卡因

Articaine hydrochloride

M.W. : 320.84

腎上腺素

L(-)-Epinephrine

M.W. : 183.2  

 

客戶提供了復(fù)方鹽酸阿替卡因注射液,鹽酸阿替卡因、腎上腺素及亞硫酸腎上腺素對(duì)照品,希望本實(shí)驗(yàn)室選擇合適的色譜柱及色譜條件,對(duì)注射液中鹽酸阿替卡因和腎上腺素進(jìn)行分析。

 

國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)(YBH17082004-2015)中,在對(duì)復(fù)方鹽酸阿替卡因注射液中腎上腺素進(jìn)行分析時(shí),使用甲醇-水進(jìn)行梯度洗脫,但由于腎上腺素極性較強(qiáng),即使初始梯度為純水相條件,腎上腺素仍緊鄰死時(shí)間出峰,保留不佳,易受到溶劑峰干擾,無(wú)法進(jìn)行準(zhǔn)確定量。

 

本實(shí)驗(yàn)室嘗試使用能夠在純水條件下穩(wěn)定使用的高極性色譜柱CAPCELL PAK C18 AQ柱,和鍵合金剛烷基的高表面極性色譜柱CAPCELL PAK ADME分別進(jìn)行分析,均無(wú)法得到理想的保留。

 

進(jìn)而,我們分別嘗試使用反相C18離子對(duì)試劑,以及直接使用離子交換色譜柱兩種方式,分別對(duì)腎上腺素進(jìn)行保留分析。

 

首先,仍然使用鹽酸阿替卡因分析中應(yīng)用到的CAPCELL PAK家族“選擇”——中等極性色譜柱CAPCELL PAK C18 MGII,并在流動(dòng)相中添加離子對(duì)試劑對(duì)腎上腺素進(jìn)行分析。

 

如圖1,對(duì)腎上腺素對(duì)照品溶液進(jìn)行分析,腎上腺素主峰保留時(shí)間為5.69 min,拖尾因子為1.19,理論塔板數(shù)為12538。

 

 

在相同色譜條件下,嘗試對(duì)亞硫酸腎上腺素標(biāo)準(zhǔn)品及注射液中的亞硫酸腎上腺素進(jìn)行分析。

 

如圖3,注射液中未明顯見(jiàn)亞硫酸腎上腺素出峰,亞硫酸腎上腺素標(biāo)準(zhǔn)品溶液能夠得到良好分析結(jié)果,保留時(shí)間為3.55min,拖尾因子為1.14,理論塔板數(shù)為14955。

考慮到使用離子對(duì)試劑的流動(dòng)相條件具有流動(dòng)相配制麻煩、有損色譜柱壽命、平衡時(shí)間長(zhǎng)等缺點(diǎn),我們也嘗試使用鍵合磺酸基團(tuán)的強(qiáng)陽(yáng)離子交換柱——CAPCELL PAK SCX進(jìn)行分析,在流動(dòng)相中添加磷酸二氫銨,通過(guò)對(duì)鹽濃度進(jìn)行調(diào)整,終,如圖4,在5 mmol/L磷酸二氫銨(磷酸調(diào)pH=2.5)條件下,亞硫酸腎上腺素保留時(shí)間為3.32 min,然而出現(xiàn)峰形拖尾現(xiàn)象,拖尾因子為2.0,不如CAPCELL PAK C18 MGII色譜柱添加離子對(duì)試劑所得分析結(jié)果好。

 

綜上實(shí)驗(yàn)結(jié)果,使用中等極性色譜柱CAPCELL PAK C18 MGII S5 4.6 mm i.d. × 250 mm,在流動(dòng)相中添加5 mM辛烷磺酸鈉、30°C柱溫條件下進(jìn)行梯度洗脫,能夠?qū)崿F(xiàn)復(fù)方鹽酸阿替卡因注射液中腎上腺素和亞硫酸腎上腺素的良好保留與分析。

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